細胞毒性を指標とするグルコアルカロイドの測定法の開発

• 課題番号: 1994003794
• 研究機関名: 食品総合研究所（食総研）
• 研究分担: 食品機能・健全性研
• 研究期間: 新Ｈ０５～Ｈ０７
• 年度: 1994
• 摘要: 組換え体の安全性を検討するために、トマトやジャガイモのグルコアルカロイドのバイオアッセイ法を開発することを目的とした。５年度は、細胞毒性を指標としてトマト中のトマチンの測定法を検討した。ビタミンＫ３投与化学発光法は、トマチンを培養動物細胞に投与後１時間培養し、その後１５分間の測定操作で毒性を検出することが可能であった。ビタミンＫ３投与化学発光法は、アラマーブルー蛍光法、ＭＴＴ色素還元法、ＷＳＴ１色素還元法等に比べ感度も高く、投与量と生存率の直線的な比例関係を示す範囲も広かった。セップパックＣ１８によるトマト抽出物の処理により、細胞系に投与できる試験液を得た。数種の細胞のうちＨｅｐＧ２が、ビタミンＫ３投与化学発光法における発光量が多く、トマチンの毒性検出および定量には適していた。トマト中のトマチンの最少検出濃度は、３μｇ／ｇであった。２０～２００μｇ／ｇのトマチンを添加したときのトマチンの回収率は、６３～１１０％であった。各種トマトのバイオアッセイを行ったところＨｅｐＧ２細胞を用いビタミンＫ３投与化学発光法で測定したものと、ＨｕＨ６ＫＫ細胞を用いてＭＴＴ色素還元法で測定したものとほぼ同様の結果を得た。供試した組換え体のトマチン濃度の増加は認められなかった。
• カテゴリ: トマト ばれいしょ 評価法