培養細胞ならびに機器分析の応用（６）

• 課題番号: 1995003653
• 研究機関名: 食品総合研究所（食総研）
• 研究分担: 食品機能・健全性研
• 研究期間: 継Ｈ０３～Ｈ０８
• 年度: 1995
• 摘要: 食品等に含まれる、毒性あるいは機能性を持った成分をより簡便に検出するため、ヒトの培養細胞（ＨｕＨ－６ＫＫ、ＨｅｐＧ２、ＨｅＬａ）やマウスの培養細胞（ＮＩＨ３Ｔ３、Ｅｈｒｌｉｃｈ）を用いてＷＳＴ－１法の検討を行った。培養細胞を薬物とともに２４時間培養し、培地を薬物を含まないものと交換した後、ＷＳＴ－１試薬とともに培養し、ＷＳＴ－１試薬の還元によって生じたホルマザンを４５０ｎｍの光の吸収で定量した。４５０ｎｍの光の吸収量は、薬物を含まない状態ではどの細胞も生細胞数に比例し、少なくとも４時間まではＷＳＴ－１試薬とともに培養した時間の長さに比例した。本法を用いてカフェインの培養細胞への作用を検討したところ、使用した細胞に対する毒性が簡易に確認できた。今後、他のアッセイ法と簡便性・感度等の比較を行い、ＷＳＴ－１法の特性を明らかにしていく。
• カテゴリ: 機能性 評価法