豚胸膜肺炎菌のＰＣＲ法による迅速検出とタイピング法の開発（１１０）

• 課題番号: 1998003752
• 研究機関名: 家畜衛生試験場（家衛試）
• 研究分担: 九州細菌寄生虫・病原機能研臨床細菌研
• 研究期間: 完Ｈ０８～Ｈ０９
• 年度: 1998
• 摘要: 本研究では，ＰＣＲ法を用いた豚胸膜肺炎菌（Ａｐｐ）迅速検出法の実用化を目指して，Ａｐｐの外膜リポ蛋白質遺伝子（ｏｍｌＡ）を標的としたＰＣＲ用最適プライマ－の構築と，高感度な菌検出を目指した試料調整方法の検討，及び野外材料を用いての実用性評価を目的としている。既に検討中のプライマーを改良した結果，１２血清型全ての参照株より約９７０ｂｐの特異的な断片が増幅され，他の２２菌種では増幅がなかった。これらＰＣＲの増幅産物を各種制限酵素で切断した結果，ＶｓｐＩによって１２血清型が５つのグループに型別され，その制限酵素消化パタ－ンにより，血清型の差異をある程度特定できるようになった。さらに野外分離株２２１株を用いても同様な成績が得られ，感染豚肺乳剤およびパラフィン包埋病理切片からの特異的増幅にも成功した。
• カテゴリ: 病害虫 診断技術 豚 防除