殺虫性物質遺伝子の構造解析（８７）

• 課題番号: 1999004202
• 研究機関名: 食品総合研究所（食総研）
• 研究分担: 素材利用・穀類特性研
• 研究期間: 継Ｈ１０～Ｈ１３
• 年度: 1999
• 摘要: 本研究では、食用作物に含まれる新規な環状ペプチドや酵素阻害タンパク質等、殺虫性物質を探索し、その遺伝子の構造を解析することを目的とする。酵素阻害タンパク質に期待される殺虫性付与以外の新規性のある用途として、動物のダイエット効果等も注目されている。１０年度は、アワ（Ｓｅｔａｒｉａ ｉｔａｌｉｃａ）種子に含まれるアミラーゼインヒビターを対象に、酢酸緩衝液による抽出、硫安沈殿（４０％飽和）、イオン交換クロマト（ＣＭトヨパール６５０Ｍ）、ゲル濾過クロマト（トヨパールＨＷ５０Ｓ）によって部分精製を行った。プロテインシークエンサーによってＮ末端アミノ酸配列を調べた結果、ソルガムインヒビターと比較的高いホモロジーを示したが、新規なインヒビターと考えられた。アワ種子からＣＴＡＢ法によってゲノムＤＮＡを抽出し、これを鋳型として、アミノ酸配列から推定される合成プローブの共存下でＰＣＲによる増幅を行い、約３００ｂｐのバンドを得た。このバンドを切り出して大腸菌（ＪＭ１０９）に組み込み、培養増殖後にアルカリミニプレップ法でＤＮＡを抽出し、シークエンシングを行った。１１年度はハトムギの酵素阻害タンパク質について同様の検討を加える。
• カテゴリ: あわ 加工 ソルガム はと麦