糸状菌細胞壁多糖生合成酵素の機能解析と応用（１３２）

• 課題番号: 115
• 研究機関名: 食品総合研究所
• 研究分担: 流通保全・微トキ制研
• 研究期間: 完７～１２
• 年度: 2000
• 摘要: 糸状菌の細胞壁はキチンなどの機能性の高い糖質より構成されているが、その生合成の中心を担う酵素は膜タンパク質であり、機能解析並びに有効利用が立遅れている。本課題は、キチン合成酵素などの構造並びに機能を解析し、広く膜タンパク質の機能解析に適応可能な技術を開発すると同時に、有用糖質を食品産業などで広く利用しやすい形で効率的に生産する系の開発を目的とする。１２年度は１１年度に明らかにされたオリゴ糖合成に必須な最小領域の大量精製と特性解析を試みた。その結果、大腸菌を宿主として封入体の状態で大量発現させた欠損変異体を、活性を有した高次構造にリフォールドし、可溶性キチンオリゴ糖合成酵素(NodC)を大量精製することに成功した。さらに、由来の異なるNodCを材料とすることにより、異なった鎖長のオリゴ糖合成が可能な2種類の可溶性NodCを得た。精製に成功した領域はβ-Glycosyltransferase活性を有する一連の膜結合型酵素群に保存されている領域であり、触媒残基を含んでいる。今後、得られた精製酵素に関して、外部に結晶化、並びにX線結晶構造解析を依頼する予定である。
• カテゴリ: 加工 機能性