蛋白質工学によるマルトペンタオース高生産酵素の開発（２０６）

• 課題番号: 171
• 研究機関名: 食品総合研究所
• 研究分担: 応微・発酵細菌研
• 研究期間: 完９～１２
• 年度: 2000
• 摘要: 本研究は、マルトペンタオース（G5）を特異的に生成するG5生成酵素を蛋白質工学的に改変することによりG5分解活性を除去し、実用性の向上を図ることを目的とする。 これまでに、Trp-57及びTyr-139をそれぞれHis、LeuまたはPheに変換する事によって、G5分解活性を約70%低下できることを明らかにした。１２年度は、G5生成アミラーゼとの相同性が高い（44%）豚膵臓アミラーゼの基質結合モデルを基に、Gln-61、Glu-223及びHis-290を幾つかのアミノ酸に置換した変異酵素を作成した。変異酵素のG5生成能を解析した結果、Asp-61、Lys-61及びHis-223の変異酵素でG5分解活性が低下していることが明らかとなった。特に、His-223変異酵素は生成したG5を殆ど分解しなかった。一方、可溶性デンプンの分解活性は野生型酵素の80%であり、G5の生産に適した酵素であると判断される。
• カテゴリ: 豚