糖・脂質をヨウ素転座先とする光反応クロスリンク標識法の開発（５２）

• 課題番号: 43
• 研究機関名: 四国農業試験場
• 研究分担: 作物開発・品質評価研
• 研究期間: 完１０～１２
• 年度: 2000
• 摘要: 光反応クロスリンク標識法は、本来はまずリガンドにクロスリンク試薬を介して放射性ヨウ素で標識後、リガンドに特異的に結合するタンパク・ペプチドへ放射性ヨウ素を紫外線照射により転座させて、結合タンパクを特異的に標識する方法である。本課題では、通常とは逆に先にタンパク・ペプチドをクロスリンク試薬で放射性ヨウ素標識後、放射性ヨウ素転座先として糖・脂質リガンドを用いることを初めて試みた。抗菌ペプチドである小麦α-チオニンとラミナリン（水溶性β-グルカンの一種）およびホスファチジルイノシトール（リン脂質の一種）の結合を蛍光偏光法により確認した。また、α-チオニンとラミナリンの結合は、還元剤の一種である水酸化ホウ素ナトリウムの添加によって解消された。α-チオニンを２種類のクロスリンク試薬（ＳＡＳＤ、ＡＰＤＰ）とそれぞれ反応させた後、さらにＩＯＤＯ－ＢＥＡＤＳを用いて放射性ヨウ素を結合させた。次に、糖質と混合して紫外線を照射することにより、α-チオニンから糖質への放射性ヨウ素転座を試みた結果、水溶性キトサンおよびキトトリオースへは転座し、しかもＳＡＳＤとＡＰＤＰの差はほとんどなかったのに対し、ラミナリンおよびラミナリトリオースへの放射性ヨウ素転座は認められなかった。また、α-チオニンからホスファチジルグリセロールへ放射性ヨウ素は転座しなかった。
• カテゴリ: 機能性 小麦