| タイトル |
ガラス化保存した牛胚の融解後のグリセリン・ショ糖液による3段階希釈法 |
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| 研究期間 |
1998～1998 |
| 研究担当者 |
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| 発行年度 |
1998 |
| 要約 |
の胚は融解時にグリセリン・ショ糖液によって3段階希釈後、野外での移植に供した。その結果、受卵牛254頭中127頭（50%）が受胎し、10%グリセリン凍結牛胚の受胎率と差が認められなかった。
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| 背景・ねらい |
ガラス化保存法は、胚を高濃度の耐凍剤に浸漬し、液体窒素ガスによる過冷却によって個化し、液体窒素中に保存する方法であり、1胚当たりの所要時間は数分で済む便利性がある。よって、融解法を含めた牛胚のガラス化保存法の確立と適正使用は牛胚保存技術の簡易化をもたらすものと考えられる。本試験では、グリセリン・ショ糖液にてガラス化牛胚を融解処理し、移植成績からこれの有効性について検討した。
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| 成果の内容・特徴 |
- 胚のガラス化保存は石森ら（1992）の報告に準拠した方法で実施した。まず胚を50%濃度のVSED（25%エチレングリコール、25%ジメチルスルフォキシド/4mg/mlBSA加D-PBS）に50秒間浸漬した。ついで、VSEDに浸漬し、直ちに図1のストロー内溶液構成になるように胚をVSEDと共にストローに吸引・閉封し（VSED浸漬からストロー閉封まで約40秒）、ストローを液体窒素ガス内（-160℃） に2分間静置後、液体窒素中に保存した。
- 融解は、ストローを空中に10秒間曝した後、20～22℃の水中に10～15秒間浸漬後、ストロー内容を混合して、35mmディッシュに回収した。
- 3分間の経過後、胚を順次0.3M、0.15Mショ糖液およびPBSにそれぞれ3分、3分および1分間浸漬後、PBS封入して移植に供した。
- 試験区の移植受胎率は50%（127/254）で、対照区の10%グリセリン凍結胚の成績（52.4%）とほぼ同様であった（表1）。
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| 成果の活用面・留意点 |
- プログラムフリーザーを使用せずに胚の保存が可能である。
- ガラス化牛胚が10%グリセリン凍結胚と同様にグリセリン・ショ糖液で融解できる。3.VSEDは雪印乳業受精卵移植研究所が特許申請中である。
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| 図表1 |
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| 図表2 |
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| 図表3 |
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| カテゴリ |
受精卵移植
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