遺伝子導入による萎黄病抵抗性イチゴ育種素材の作出法

• 担当機関: 奈良県農技セ
• 研究期間: 1999～2001
• 研究担当者: 浅尾浩史; 都築正男; 西崎仁博; 西澤洋子（農業生物資源研究所）; 新名惇彦（奈良先端大）
• 発行年度: 2001
• 要約: prxC2（西洋ワサビ由来ペルオキシダーゼ遺伝子）あるいはRCC2（イネ由来キチナーゼ遺伝子）をアグロバクテリウム法でイチゴ「アスカルビー」へ導入した個体を、イチゴ萎黄病菌汚染土壌で検定することによって、病害抵抗性個体を選抜できる。
• キーワード: prxC2、RCC2、イチゴ、萎黄病、抵抗性個体
• 背景・ねらい: イチゴ新品種「アスカルビー」は良味・高品質で市場から高い評価を受けているが、萎黄病等の病害によって、栽培農家の経営を圧迫している。耐病性イチゴ品種の開発が望まれており、萎黄病抵抗性品種を利用できれば、育苗から本圃での栽培までの汚染による打撃が回避できる。そこで、アグロバクテリウム法によって、イチゴ「アスカルビー」に有用遺伝子を導入して、萎黄病抵抗性個体を選抜・育成する。

成果の内容・特徴

1. 導入には、CaMV35S-prxC2遺伝子（西洋ワサビ由来ペルオキシダーゼ遺伝子）、EN4-RCC2遺伝子（イネ由来キチナーゼ遺伝子）を組み込んだバイナリーベクター(pBI121)を持つアグロバクテリウムを用いる。「アスカルビー」の無菌培養植物の葉と葉柄組織に感染させ、2日間共存培養後、選択培地で選抜する。選択はショ糖3%、BA２mg/L、2,4-D 0.2 mg/Lを加えたMS培地（寒天0.8%）、再分化は2,4-D 0.2 mg/Lを除いた培地、発根はホルモン無添加のMS培地で、それぞれカナマイシン50mg/L、カルベニシリン100 mg/Lを添加する。
   
2. 表１に示すとおり、prxC2導入個体は154個体（7.0%）、RCC2導入個体は56個体（3.6%）得られており、遺伝子の導入はPCRによって確認している。
   
3. 隔離温室で生育させた形質転換「アスカルビー」を、菌密度が50,000cfu/g乾土の萎黄病菌の汚染土壌に2001年9月2日に定植した後、11月29日に発病程度を調査すると、prxC2導入個体では5個体（783、785-1、785-2、819-1、819-2）、RCC2導入個体では1個体（341）が発病せず抵抗性を示す（表２、表３）。
   
4. prxC2あるいはRCC2の導入は萎黄病抵抗性個体の作出に有効である。
   

成果の活用面・留意点

1. 萎黄病抵抗性の検定を繰り返し行い、安定的に抵抗性を獲得した個体を選抜する必要がある。
   
2. 遺伝子導入の手法を用いているので、安全性評価試験を行う必要がある。
   

• カテゴリ: 萎黄病 育種 育苗 いちご 経営管理 栽培技術 新品種 抵抗性 抵抗性品種 病害抵抗性 品種 わさび