ＤＮＡマーカーを用いたチャ品種識別技術

• 担当機関: 野菜・茶業試験場
• 研究期間: 2000～2000
• 研究担当者: Shiv Shankhar Kaundun; 松元哲; 水野直美
• 発行年度: 2000
• 要約: 〔要約〕チャの二次代謝に関与する６遺伝子座13個のDNAマーカーを比較することにより、チャ45品種の識別ができる。特に主要品種の‘やぶきた’は特徴的なマーカーを有するため容易に識別できる。
• キーワード: 二次代謝、13個のDNAマーカー、チャ45品種の識別、‘やぶきた’野菜・茶業試験場 茶栽培部 生理遺伝研究室
• 背景・ねらい: 緑茶の主要品種である‘やぶきた’は品種茶園栽培面積の約84％を占めているが、摘採時期の集中や味、香りの単一化が問題となっており、脱‘やぶきた’に向けた取り組みが加速している。チャの多品種化に伴い、育種場面のみならず、栽培、加工・流通面でも品種の識別が必要である。しかしチャの葉型、葉の大小、葉色等は品種間差異が少なく、また栽培条件によって変わりやすいため、外部形態から品種を識別することは難しい。DNAマーカーは試料の栽培条件を問わず、微量なDNAでも品種識別が可能である。本研究のねらいはDNAマーカーの検索及びチャ品種の識別技術の開発である。

成果の内容・特徴

1. 新鮮葉から抽出したDNAを用い、複数の二次代謝関連遺伝子を標的にしたPCR反応を行った。フェニルアラニンアンモニアリアーゼ（PAL）のイントロン部分は、α型と欠失のあるβ型があり（図１左)、さらにα型は制限酵素DdeⅠ処理によりα_１とα_２型に分かれる。これらを用いてチャ品種を６遺伝子型に分類できる（図１右）。
   
2. ‘やぶきた’はチャ45品種の中でα_２α_２型を示す唯一の品種であるため識別は極めて容易である。ββ型は‘あさつゆ’、‘うじみどり’の２品種のみであり、‘やぶきた’と‘あさつゆ’を交配親にもつ‘さえみどり’はα_２β型である。
   
3. ジヒドロフラボノール・レタクターゼ（DFR）のイントロン３部分は、Hind Ⅲ制限酵素認識部位の有無で２個（Ａ_１とＡ_２）に分かれ、チャ品種を３遺伝子型（Ａ_１Ａ_１，Ａ_１Ａ_２，Ａ_２Ａ_２）に分類できる（図２）。
   
4. このほかPALエクソン１、２、DFRイントロン４及びカルコンシンターゼ（CHS）エクソン2部分の合計６遺伝子座13個のDNAマーカーを利用して（表１）、チャ45品種について識別が可能である（表２）。
   

成果の活用面・留意点

1. 製造加工された茶をDNA試料として用いる場合は、PCRによる増幅反応が進みにくいDNAマーカーもあるため、注意する。
   
2. 各DNAマーカーは一遺伝子座の対立遺伝子として遺伝することから、親子鑑定に使用できる。
   

• カテゴリ: 育種 加工 栽培条件 茶 DNAマーカー 品種