ブドウ黒とう病菌の効率的な分生子形成法

• 担当機関: （独）農業・食品産業技術総合研究機構 果樹研究所
• 研究期間: 2006～2008
• 研究担当者: 河野 淳; 中畝良二; 山田昌彦; 中野正明; 三谷宣仁; 上野俊人
• 発行年度: 2009
• 要約: ブドウ黒とう病菌(Elsinoe ampelina)をジャガイモ煎汁寒天(PDA)培地上で短期間、低密度で生育させ、得られたコロニーを純水中で8時間程度振とう培養することで、安定的に大量の分生子を得ることができる。
• キーワード: ブドウ黒とう病、分生子形成、純水中振とう培養、分生子懸濁液調整
• 背景・ねらい: ブドウ黒とう病は雨媒伝染性の病害であり、多雨地域でのブドウ露地栽培において重大な問題となっている。黒とう病抵抗性品種を育成するためには、黒とう病抵抗性の検定が不可欠であり、接種源となる分生子を安定的に確保する必要がある。しかし、既報の手法では分生子形成は不安定であり、大量の分生子を安定的に得ることができる技術は未確立である。そこで、培地上で生育させた黒とう病菌を用い、分生子形成の条件を検討し、安定的に大量の分生子を得るための培養法を開発する。

成果の内容・特徴

1. PDA培地上で5～6日間前培養したブドウ黒とう病菌のコロニー10個(図1)を200μlの純水中で振とう培養(24℃、150rpm)すると、培養開始から8～10時間後には分生子形成がほぼ極大に達する(図2)。
2. 上記の条件で形成される分生子の数は、前培養における培地上でのコロニー密度に大きく依存し、低密度で生育したコロニーはより安定して多くの分生子を形成する(図3)。
3. 高密度の分生子懸濁液を得るには、前培養のコロニー密度を2.5個/cm²以下とする(図3、図4)。前培養のコロニー密度を1.0個/cm²以下として6日間前培養を行うと最も効率的に多量の分生子が得られる(図4)。
4. 本法により形成された分生子の懸濁液(5×103個/ml)を、ブドウ葉に接種することにより病斑が形成される(データ略)。また、分生子は20%グリセロールに懸濁後、 ～80℃下で長期間保存できる(データ略)。

成果の活用面・留意点

1. 年間を通じて黒とう病菌の分生子懸濁液の調製が可能となり、抵抗性の検定に利用できる。
2. 前培養のコロニー密度が高い場合でも、前培養日数を5日程度と短くすることで、ある程度の濃度の分生子懸濁液を得ることができる。
3. 純水中での培養時間が24時間以上になると、分生子が発芽する場合があるため、必要以上に培養時間を長くしない。

• カテゴリ: 抵抗性 抵抗性品種 ばれいしょ ぶどう