ｄ．プリオン病の防除技術の開発

• 課題番号: 200709587
• 研究機関名: 農業・食品産業技術総合研究機構
• 研究分担: 農業・食品産業技術総合研究機構,動衛研,プリオン病研究チーム
• 協力分担関係: 富士レビオ; PeopleBio; 産業総合技術研究所; 動物医薬品検査所; 東北大学; ソウル大学; 生物資源研究所; 北海道立畜産試験場; 九州大学; アドバンスソフト
• 研究期間: 2006-2010
• 年度: 2007
• 摘要: １）プリオン病の診断技術の開発に関しては、PrPScに対する特異的なプローブとしてのアプタマーの作製とそれを用いたプリオン濃縮法を確立した。血清などからのプリオン濃縮法への有用性が示唆されており、医薬品の安全性担保への応用が期待されている。また、複数のPrPSc特異抗体を作出し、その反応性の違いから、スクレイピー、牛海綿状脳症（BSE）のPrPScの立体構造の違いを明らかにした。２）プリオンの試験管内増幅法の一つであるPMCA法によりスクレイピー感染ハムスターの血液、尿中からのPrPSc高感度検出法（ウエスタンブロット法の10億倍、バイオアッセイ法の10万倍）を確立し、PrPScの体液中での動態を明らかにした。ハムスターではPrPScが尿中から検出されるほか、未発症期の白血球からも検出されることが示された。また、PMCA法で羊スクレイピーおよびBSE由来PrPScを増幅するための候補条件を明らかにした。本成果はBSE等プリオン病の生前診断法開発の可能性を明確にした。３）プリオンの伝達性にはPrPScのアミロイド構造が関与していることを明らかにし、不活化に必要な構造変化を明らかにする上で、有用な情報を得た。４）プリオン病の発病機構を試験管内にて解明するため、樹立したプリオン感染ミクログリア細胞の解析から、チャンネル型ATP受容体ファミリーの一つであるP2X7の機能亢進が神経変性の一因である可能性を提示した。５）BSEプリオン感染における「種の壁」に関与する因子を明らかにすることを目的として、各種の遺伝子組換えマウスを用いた伝達試験により、ハムスターのBSEプリオンに対する抵抗性に関する領域を明らかにした。また、異種動物へ伝達するとプリオンの伝達性（病原性）が強くなることを示した。さらに複数の遺伝子組換えマウス（ノックインマウス）を用いたCJD伝達試験により、PrP遺伝子のヘテロ性によりPrPScへの変換抑制が起こることを明らかにした。６）開発した高感度ウエスタンブロット法を用いてBSE感染牛の末梢神経におけるPrPSc蓄積時期を明らかにした。特定危険部位(SRM)以外におけるPrPScの出現は中枢神経系でのPrPScの蓄積が起こる時期以降であることから、現行のBSE検査で陽性牛を排除することにより末梢でのBSEのリスクも排除されることを明らかにし、リスク管理措置に貢献した。７）国内の非定型症例（BSE/JP8）、若齢型症例（BSE/JP9）について遺伝子組換えマウスを用いた伝達試験を行い、当該試料中のプリオンが103LD50/g以下であったことを明らかにした。この成果については内閣府食品安全委員会にも報告した。８）我が国のBSE検査システムが鹿慢性消耗病（CWD）にも適用でき、この検査法で国内にCWDに感染したシカは認められないことを明らかにするとともに、我が国の伝達性海綿状脳症（TSE）の防疫対策に資するため、CWDを含むTSEサーベイランスのとりまとめを公表した。
• カテゴリ: 病害虫 シカ 診断技術 抵抗性 羊 防除