PCR法によるニワトリからのサルモネラの検出

• 担当機関: 愛知県農業総合試験場
• 研究期間: 1997～1997
• 発行年度: 1997
• 要約: サルモネラの鞭毛遺伝子断片を利用したPCR法により、ニワトリの盲腸便からのサルモネラの検出について検討した。その結果、従来3日間かかっていた増菌選択培養法によるサルモネラの検出が、増菌に12時間とPCR法操作に6時間の18時間で可能となり、迅速性が向上した。
• 背景・ねらい: ニワトリのサルモネラ症は幼雛期に発生が多く死亡率も高い。また、卵肉のサルモネ; ラ汚染は人の食中毒の原因菌として公衆衛生の面からも懸念されており、養鶏場にお; けるサルモネラの清浄化が切望されている。しかし、現在のサルモネラ検出法は多数; の検体と増菌・選択培養による長時間の作業を必要としている。そこで、ニワトリの; 盲腸便を12時間増菌培養した後サルモネラの鞭毛遺伝子断片を利用したPCR法によ; る検出をSalmonellaEntertidis（SE）とSalmonella Typhimurium（ST）を用い; て検討した。

成果の内容・特徴

1. 純粋培養したSE及びST菌液でのPCR法による検出では、101～2CFU/0.1mlまで菌の検出が可能であった。（表1）
   
2. 盲腸便10%を加えた培養液での検出では、102～3CFU/0.1mlまで低下し、5検体のうち1検体は102～3CFU/0.1mlでも検出できなかった。（表2）
   
3. ニワトリに1羽あたり100.3CFUから104.6CFUのST菌量を各4羽に経口投与し、3日後の盲腸便を12時間増菌培養後、PCR法と従来の選択培養法とを比較した。PCR法では101.4CFU/羽 投与した鶏群で4羽中2羽が陰性、選択培養法では1羽が陰性であった。その他の投与菌量では選択培地とPCR法による検出は同じ成績であった。（表3）
   
4. ニワトリからのサルモネラの検出は多数の検体を必要とするため、増菌培養後PCR法でスクリーニングを行い、陽性の検体のみを選択培養すれば18時間で判定ができ、検出精度を低下させることなく多くの検体を検査でき、同時に時間を短縮させることができる。
   

• 成果の活用面・留意点: 養鶏場や食鶏処理場においてニワトリの盲腸便を用いたサルモネラ検出に応用できる。
• カテゴリ: 鶏