アールス系温室メロンの日持ち性形質(非黄化形質)を識別できるPCRマーカー

タイトル アールス系温室メロンの日持ち性形質(非黄化形質)を識別できるPCRマーカー
担当機関 愛知県農業総合試験場
研究期間 1999~2001
研究担当者
発行年度 1999
要約 アールス系温室メロン「アイソフィ」由来の品種・系統の日持ち性形質(非黄化形質)と連鎖するPCRマーカ-C1、C2の開発により、日持ち性形質の葉部検定による遺伝子型の推定を可能にした。
背景・ねらい アールス系温室メロンF1品種は、収穫期になっても果皮が黄化しにくく、日持ち性の高い(非黄化形質)ものが望まれている。非黄化形質は1遺伝子に支配され、黄化しにくい形質が優性に発現することが知られている。育種効率を高めるため、愛知県で育成した温室メロンF1品種「アイソフィ」を材料に、非黄化形質と連鎖するPCRマーカーを開発する。
成果の内容・特徴
  1. PCRマーカ-C1、C2を開発し、「アイソフィ」自殖F2集団を用いて連鎖解析を行った。2.オペロン社のプライマー(OPA8、OPB16)に由来するプライマ-C1によるPCR反応で生じる非黄化親に特異的な約700bpのDNA断片は、非黄化形質と強く連鎖していたが、組換え型が69個体中2個体出現したことから非黄化形質との地図距離は3.1CMである 図1、表1)。
  2. 上記のDNA断片の近くのゲノム上に設定したプライマ-C2によるPCR反応で生じる838bpのDNA断片を、制限酵素Alu で処理すると、非黄化親は、454、255、129bpに、日持ち性が普通の親は454、255、85、44bpに切断され、多型が検出された。プライマ-C2による多型は非黄化形質と強く連鎖し、非黄化形質とマーカー間の地図距離は2.9CMであり、ホモ、ヘテロの判定も可能である(図1、表1)。
  3. プライマ-C1、C2を用いて多型を検出することで、葉部検定が可能となり、非黄化を示すホモ遺伝子型個体を選抜できる。
成果の活用面・留意点
  1. 使用する酵素、サーマルサイクラー(DNA増幅装置)の機種に応じて、PCR反応条件を考慮する必要がある。
  2. PCR反応にはCTAB法で抽出したDNA試料を用いるのが望ましい。
  3. 「アイソフィ」以外の品種では、「クレスト春秋系」(横浜植木育成)の自殖F2集団でのマーカ-C1、C2の有効性が、確認されている。
図表1 216062-1.gif
図表2 216062-2.gif
カテゴリ 育種 品種 メロン

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