血管内皮成長因子は牛未成熟卵子の体外成熟率を向上させる

• 担当機関: （独）農業技術研究機構 畜産草地研究所
• 研究期間: 1998～2000
• 研究担当者: 平子誠; 木村康二; 羅海玲
• 発行年度: 2001
• 要約: 小卵胞から回収した牛の卵丘卵子複合体を、１～10ng/mlの血管内皮成長因子を添加した体外成熟培地中で培養することにより、成熟率、体外受精による正常受精率および体外培養による発生率を向上させることができる。
• キーワード: 牛、繁殖、卵子、体外成熟、体外受精、体外培養、血管内皮成長因子
• 背景・ねらい: 血管内皮成長因子（ＶＥＧＦ）は、血管内皮細胞の増殖を促し、血管壁の透過性を増大させることが知られており、卵胞の発育、黄体や胎盤の形成など、組織の新生において重要な役割を果たしている。卵胞が大きくなるにつれて卵胞液中のＶＥＧＦ濃度が増加し、顆粒膜細胞に存在するＶＥＧＦの受容体も増加することから、卵子の成熟に対しても何らかの作用を及ぼしている可能性が高い。一方、体外受精では、卵丘卵子複合体を卵胞から取り出して培養するため、卵胞中で成熟する場合と比べてＶＥＧＦの不足が懸念される。そこで、体外受精における正常成熟率の向上を目的として、卵胞内と同程度のＶＥＧＦを培養液に添加し、その効果を検討した。
• 成果の内容・特徴: 1.; 培養液（成熟：10％牛胎子血清加修正合成卵管液、受精：修正ＢＯ液、培養：１％牛胎子血清加修正合成卵管液）に０、0.1、１、10ng/mlのヒト組換えＶＥＧＦ165を添加して牛未成熟卵子の体外成熟（22時間）・受精（６時間）・培養（48時間）を行ったところ、１ng/mlおよび10ng/ml添加区で体外発生率が向上した（表1）。; 2.; 培養液に５ng/mlのＶＥＧＦを添加して牛未成熟卵子の体外成熟を行ったところ、成熟率が向上した（表2）。; 3.; 培養液に５ng/mlのＶＥＧＦを添加して牛未成熟卵子の体外成熟と体外受精を行ったところ、成熟率、精子進入率および正常受精率が向上した（表3）。; 4.; 培養液に５ng/mlのＶＥＧＦを添加して牛未成熟卵子の体外成熟を行い、その後ＶＥＧＦ無添加の条件で体外受精および７日間の培養を行ったところ、胚盤胞への発生率が向上した（表4）。
• 成果の活用面・留意点: 1.; 体外受精用牛卵胞卵子の成熟培養に利用できる。牛だけでなく、他の動物卵子の成熟培養にも利用できる可能性がある。; 2.; アミノ酸配列の異なる異性体が多数存在するため、動物種や異性体の種類毎に至適濃度が異なる可能性がある。また、培養条件によっては充分な効果が得られない場合もある。
• カテゴリ: 繁殖性改善