DNAマーカーによるネギネクロバネキノコバエの近縁他種からの識別法

タイトル	DNAマーカーによるネギネクロバネキノコバエの近縁他種からの識別法
担当機関	（国研）農業・食品産業技術総合研究機構中央農業研究センター
研究期間	2016～2018
研究担当者	有本誠上杉龍士日本典秀長坂幸吉吉松慎一末吉昌宏
発行年度	2018
要約	種特異的プライマーを用いたPCRにより、国内で新規発生したネギネクロバネキノコバエを国内既知害虫種から迅速に識別する手法である。
キーワード	クロバネキノコバエ、種特異的プライマー、分子系統解析
背景・ねらい	ネギネクロバネキノコバエ(Bradysia odoriphaga)は、2014年に埼玉県で初めて発生が確認されたネギやニンジンの害虫であり、現在は群馬県でも発生している。本種の分布拡大を防ぐためには、圃場で発見される種を迅速に同定し、侵入早期の低密度段階で適切な防除を行う必要がある。一般的に、クロバネキノコバエ科の同定は成虫の形態的特徴に基づいて行われる。しかし、圃場では本種との形態的な識別が困難な近縁種も発生する。また、形態による同定が困難な幼虫や蛹のみが発見される場合もある。そこで、分子系統解析により本種の系統学的位置を推定した上で、DNAマーカーによって本種を他種から迅速に識別する手法を開発する。
成果の内容・特徴	DNAバーコード領域(ミトコンドリアDNA COI領域)の分子系統解析では、ネギネクロバネキノコバエは中国に分布するBradysia odoriphagaと遺伝的に近縁である(図1)。本種特異的プライマー(BCOF1)とLCO1490及びHCO2198を用いたマルチプレックスPCRにより、PCR産物長の違いにより本種を国内に分布するチバクロバネキノコバエなどの近縁他種から明確に識別できる(表1、図2及び図3)。本識別法は本種の成虫だけでなく幼虫や蛹についても、他種から識別することが可能である(図3)。本識別法をネギ圃場で発見されるクロバネキノコバエ類の識別に利用することにより、本種の発生の有無を迅速に確認することができる。
成果の活用面・留意点	本識別法はネギネクロバネキノコバエが発生している埼玉県や群馬県の病害虫防除所、県から同定依頼を受ける植物防疫所において活用できる。本種以外の種を同定するためには、PCR増幅産物の塩基配列解析が必要である。
研究内容	http://www.naro.affrc.go.jp/project/results/4th_laboratory/carc/2018/carc18_s09.html
カテゴリ	病害虫害虫チバクロバネキノコバエ DNAマーカーにんじんねぎ病害虫防除防除