ＤＮＡマーカーによる愛知県育成キク品種「白粋」の識別

• 担当機関: 愛知農総試
• 研究期間: 2006～2008
• 研究担当者: 吉川友紀; 水上優子; 浅見逸夫; 大竹良知
• 発行年度: 2007
• 要約: 愛知県が育成した白一輪ギク品種「白粋」について、市場に流通している主な白一輪ギク品種から、４種類のRAPDプライマーによる多型をDNAマーカーとして用いて識別できる。
• キーワード: 輪ギク、品種識別、DNAマーカー、RAPD法、白粋
• 背景・ねらい: 愛知県が育成した白一輪ギク品種「白粋」について、品種が持つ固有の遺伝情報の違いを正確、確実に識別する技術を確立し、知的財産権の侵害の防止と、県内園芸産地の振興に役立てる。本研究では、RAPD(Random Amplified polymorphic DNA)法によって、市場に流通する主な品種と「白粋」を識別するDNAマーカーを開発する。
• 成果の内容・特徴: １．; 「白粋」と、識別対象品種・系統として、全国の花き卸10社を対象にした2006年の花き品種別流通動向分析調査によるキク流通量上位10品種の中から選定した白一輪ギク「神馬」、「精興の誠」、「岩の白扇」、「フローラル優香」、「精の波」の５品種、さらに、他の白一輪ギク品種「吉良の馬」、「新神」、「神馬無側枝系統」、「神馬２号」、「清流の朝」と、現在生産はほとんどないが、かつての主力品種の「金丸富士」、「秀芳の力」の計13品種・系統を用いる。これらの中から「白粋」を以下の手法で識別できる。; ２．; これら13品種・系統について、市販の10塩基ランダムプライマー（OPERON社）を用いてＰＣＲ増幅し、バンドパターンの違いを検証するRAPD法によって品種間多型を検出する。 ＤＮＡは、葉片からDNeasy Plant Mini kit(QIAGEN社)を用いて抽出し、10～20ng/μLに調整し、ＰＣＲ反応の鋳型DNAとする。反応液は、10μM プライマー：0.5μL、AmpliTaq Gold DNA polymerase（5Units/μL：Roche社）：0.1μL、10倍希釈添付Buffer：1.0μL、2mM dNTPs：1.0μL、鋳型DNA：1.0μL、滅菌水：6.4μLの計10μLとする。ＰＣＲ反応は94℃９分、（94℃１分・36℃１分・72℃２分）45サイクル、72℃7分の条件で行う。; ３．; 「白粋」については、OPA10、OPG5、OPG6、OPG19のプライマー(表１)によって、他の品種・系統と識別することができる。「白粋」は、OPA10の550bp、OPG6の200bp、OPG19の700bpのバンドが有り、OPG5の250bpのバンドが無い。（図１、表２）
• 成果の活用面・留意点: １．; 愛知県の育成キク品種「白粋」の育成者権の保護に活用できる。; ２．; 現行流通している主要品種から「白粋」を確実に識別できる。しかし、今回検定に供試した以外の品種・系統については別途検定する必要がある。
• カテゴリ: 馬 きく DNAマーカー 品種