ブタ骨格筋における,ミオシン重鎖アイソフォーム発現様式解析法

• 担当機関: 畜産試験場
• 研究期間: 1998～2000
• 研究担当者: 室谷 進; 千國幸一; 中島郁世; 田邊亮一
• 発行年度: 1998
• 要約: ブタ骨格筋には4種類のミオシン重鎖(MyHC)アイソフォームが存在する。ブタMyHC-2xの部分cDNA配列を新たに決定した。決定した配列を基に,RT-PCR法を用いて,4種類のMyHCアイソフォームの量比を分析する方法を開発した。開発した方法で,ブタの筋肉によるMyHCアイソフォーム発現様式の違いを明らかにできた。
• 背景・ねらい: ミオシンは,骨格筋の筋原線維タンパク質重量の約43%を占める,筋肉内の主要タンパク質である。成熟した家畜の骨格筋には,分子構造が少しずつ異なる4種類のミオシン重鎖(MyHC)アイソフォームが存在する(MyHC-2a,一2b,一2x,一slow)。この各アイソフォームがど様な割合で存在しているかという,MyHCアイソフォームの発現様式は,食肉の品質,特に食感(テクスチャー)に影響を及ぼすのではないかと考えられている。しかし,MyHCアイソフォームの発現様式の分析法が無いことが研究上のネックになっていた。; そこで,RT-PCR法によって,豚のMyHCアイソフォーム発現様式を解析する方法を開発することを目的に研究を行った。さらに,開発した手法を用いて,ブタの筋肉によるMyHCアイソフォーム発現様式の違いを検出した。
• 成果の内容・特徴: １．; 図1)。これらのプライマーを用いて,テンプレートに含まれる各MyHCアイソフォームDNAの量比に対応したPCR産物が得られるようなマルチプレックスPCR法を開発した。筋肉中のRNAから合成したcDNAをテンプレートとして上記のPCR法を行うことによって(RT-PCR),筋肉中の各MyHCアイソフォームの量比を推定することが可能となった。; ２．; 図2)。
• 成果の活用面・留意点: １．; 本研究により初めて,4種類すべてのMyHCアイソフォームの量比を分析できるようになった。この手法はMyHCアイソフォームと食肉の品質の関連を明らかにする研究だけでなく,家畜組織学,家畜生理学の分野にも有効な手段となると思われる。
• カテゴリ: 豚