ヒラメ仔稚魚の感染・昇温処理によるVHSへの免疫獲得

• 担当機関: 独立行政法人水産総合研究センター養殖研究所
• 研究期間: 2004～2006
• 研究担当者: 栗田 潤; 佐野元彦; 松山知正; 中易千早
• 発行年度: 2007
• 背景・ねらい: ヒラメのVHS感染症において、成魚を用いて20℃で感染試験を行った場合、15℃での感染試験と比較して死亡は著しく減少する。また、20℃でVHSVに浸漬したヒラメは15℃でのVHSV再感染に対して強い抵抗性を示す。本研究ではVHSV感染症をモデルとし、20℃でのVHSV感染による免疫獲得を指標としてヒラメにおける獲得免疫の成熟時期の推定を行った。また、モノクローナル抗体を用いて仔稚魚期における末梢血白血球の発生分化を分析し、VHSVに対する免疫獲得と、生体防御機構の発達との関連を考察した。
• 成果の内容・特徴: 仔魚期から全長30mmまでの稚魚では、水温20℃においてもVHSVに感受性を示し、約半数がVHSV感染により死亡した。生残魚を用いた再感染試験においても死亡率は高く、この成長段階の仔稚魚では感染抵抗性を殆ど獲得していなかった。全長50mmの稚魚では、水温20℃での感染試験では全く死亡は観察されず、水温15℃での再感染試験においても、水温20℃での1度目の感染試験を経験した魚は殆ど死亡しなかった（死亡率2.5%）。全長100mm以上では、水温20℃での感染試験においても、その後の再感染試験においても全く死亡は観察されなかった。このことから、全長30～50 mmの成長段階で、ヒラメの生体防御システムに成熟が起こり、強い感染防御活性が付与されると考えられた。; モノクローナル抗体を用いて仔稚魚期における末梢血白血球組成を解析した結果、リンパ球を認識する抗体に反応する細胞は存在せず、仔魚期ではリンパ球が存在しないか未熟であると考えられた。一方で、仔魚では食細胞の比率が極めて高く、非特異的生体防御機構に依存していると考えられた。リンパ球に反応する抗体2種に陽性を示す細胞は、全長22.5mmおよび33.0mmで始めた観察され、成長に伴って出現率が急速に増加した。リンパ球の出現・増加時期はVHSV感染抵抗性の獲得時期と一致しており、抵抗性の獲得にはリンパ球系の細胞が働いている可能性が考えられた。
• 成果の活用面・留意点: 成長の初期にワクチンを投与することができれば、感染症による初期減耗を抑制できる。一方、免疫系の未発達な仔稚魚にワクチンを投与しても、十分な防御効果は発揮されない。従って、高い防御効果が期待できる最低成長段階を特定する必要がある。今回の研究で、ヒラメでは全長30～50 mmの成長段階で生体防御システムに成熟が起こることが明らかとなり、ワクチン投与に必要な最低魚体サイズが示された。
• カテゴリ: 抵抗性